Павел Забродский: Влияние холинергической стимуляции на функцию фагоцитарно-моноцитарной системы при моделировании сепсисаНазад
Павел Забродский: Влияние холинергической стимуляции на функцию фагоцитарно-моноцитарной системы при моделировании сепсиса
По данным литературы в настоящее время смертность от сепсиса составляет 1/3 от всех смертельных исходов, связанных с болезнями и их осложнениями [5]. Известно, что холинергическая стимуляция существенно снижает летальность белых мышей от сепсиса, вызванного моделированием экспериментальной инфекции [1]. Высказано предположение о возможности использования холиномиметиков (в том числе, ацетилхолина - АХ) для экстренной активации антимикробной резистентности организма при различных инфекционных процессах [2]. В последние годы было опубликовано несколько тысяч работ, в которых рассматривались проблемы терапии септических состояний (различных инфекционных процессов) активацией холинергической системы, в частности, 7н-холинорецептора АХ (7nAChR) [6,7,10,11], а также роли цитокинов (в основном, фактора некроза опухоли- ФНО, ИЛ-1, ИЛ-6 и ИЛ-10) в патогенезе сепсиса и регуляции холинергической системой их продукции моноцитарно-макрофагальной системой - ФМС (моноцитами, макрофагами, нейтрофилами) [7,8,13,14].
Сформулированный в начале нынешнего века время феномен "холинергического противовоспалительного механизма" (cholinergic anti-inflammatory pathway) [8,10,12] в ранней фазе сепсиса [7] подтверждает результаты более ранних исследований [1,2] и свидетельствует о тесной связи нервной и иммунной систем [3,4,5]. В настоящее время существует необходимость в исследовании действия АХ и его агонистов, на летальность при сепсисе, вызванном различными инфекционными состояниями, и содержание провоспалительных цитокинов в крови, определяющих течение и исход сепсиса [10,11,12].
Целью исследования являлась оценка влияния АХ на функцию ФМС по летальности от сепсиса мышей, вызванного экспериментальным перитонитом и содержанию в крови провоспалительных цитокинов ФНО?, ИЛ-1? и ИЛ-6.
Опыты проводили на неинбредных белых мышах обоего пола массой 18-22 г. АХ хлорид вводили подкожно (общепринятый способ применения АХ [3]) однократно в дозе 20 мг/кг, вызывающей выраженную холинергическую стимуляцию [2,3] и увеличение выживаемости животных при экспериментальной инфекции [2].
Экспериментальные животные были разделены на 3 группы. Первую группу мышей составляли интактные животные, которым внутрибрюшинно и подкожно вводили соответственно 2 и 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия. Вторая группа мышей получала внутрибрюшинно 2 мл изотонического раствора хлорида натрия, содержащей взвесь 2·109 суточной культуры микробных тел E. coli, а также подкожно 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия. Первой и второй группам животных подкожное введение 0,5 мл изотонического раствора хлорида натрия проводили за 6 ч до внутриперитонеального введения соответственно 2 мл изотонического раствора хлорида натрия и 2 мл взвеси 2·109 суточной культуры микробных тел E. coli (моделирование сепсиса). У третьей группы мышей через 6 ч после введения АХ в период полного отсутствия клинических признаков холинергической стимуляции [3] вызывали сепсис внутриперитонеальным введением 2·109 суточной культуры микробных тел E. coli. Способ введения микробных тел и их доза обоснованы исследованиями, проведенными нами [1,2,3] и другими авторами [13]. Проводили регистрацию летальности мышей во второй и третьей группах через 10 и 25 ч после моделирования септического процесса. Сроки регистрации летальности обусловлены тем, что через 10 ч погибала значительная часть животных, а через 25 ч гибель животных от сепсиса достигала максимума и практически заканчивалась [1,3]. Концентрацию цитокинов ФНО?, ИЛ-1? и ИЛ-6 исследовали в плазме крови первой группы животных и у выживших мышей второй и третьей группы через 10 и 25 ч после внутриперитонеального введения E.coli методом ферментного иммуносорбентного анализа (ELISA), используя наборы (ELISA Kits) фирмы BioSource Int. Кровь для исследований забирали из хвостовой вены. Полученные данные обрабатывали статистически с использованием t-критерия достоверности Стьюдента.
При исследовании летальности белых мышей после моделирования сепсиса с применением и без применения АХ установлено (табл. 1), что через 10 ч после внутриперитонеального введения E. coli АХ приводил к снижению исследованного показателя на 36 % (p<0,05), а через 25 ч - на 24 % (p<0,05).
